大前庭导水管综合征的确诊需结合影像学检查和听力学评估。诊断方法主要有颞骨高分辨率CT、内耳MRI、纯音测听、听性脑干反应测试和基因检测。
颞骨高分辨率CT能清晰显示前庭导水管扩大这一特征性改变，正常前庭导水管中段直径不超过1.5毫米，若测量值超过此标准则具有诊断意义。检查时需注意扫描层厚应控制在1毫米以内，以避免漏诊微小结构异常。
内耳MRI可辅助评估膜迷路发育情况，通过三维重建技术能更直观显示内淋巴囊扩大等伴随畸形。钆增强MRI有助于鉴别梅尼埃病等其它内耳疾病，该检查对软组织的分辨率优于CT。
纯音测听可发现典型低频感音神经聋，多数患者表现为渐进性或波动性听力下降。测试时应包含250-8000赫兹各频率，特征性表现为低频气骨导差消失但骨导阈值升高。
听性脑干反应测试能客观评估听觉通路功能状态，典型改变包括I波潜伏期延长和I-III波间期延长。该检查对婴幼儿等无法配合主观测听的患者尤为重要，可早期发现听觉传导异常。
基因检测可发现SLC26A4基因突变，该基因突变与约60%的病例相关。对于有家族史或合并甲状腺异常的患者，建议进行二代测序以明确分子诊断。检测阳性结果可支持临床诊断，但阴性结果不能排除疾病。
确诊需满足影像学显示前庭导水管扩大合并感音神经聋，并排除外伤、感染等其他致聋因素。儿童患者出现突发性聋或波动性听力下降时，应考虑该病可能并及时转诊耳鼻喉科。
