乳糖不耐受在婴幼儿中较为常见，诊断需结合临床表现和医学检测。乳糖不耐受的诊断标准主要有临床表现、氢呼气试验、粪便还原糖及pH值检测、基因检测以及乳糖酶活性测定。
临床表现是初步判断的重要依据。患儿通常在摄入含乳糖的母乳或配方奶后出现腹泻、腹胀、肠鸣音亢进等症状，排便呈水样带泡沫，可能伴随哭闹不安。症状多在喂养后30分钟至2小时内出现，停止乳糖摄入后缓解。
氢呼气试验是诊断乳糖不耐受的金标准。患儿空腹服用乳糖溶液后，通过检测呼气中氢气浓度变化来判断乳糖消化情况。若氢气浓度较基线值升高超过20ppm，提示乳糖消化吸收不良。该检测需在专业医疗机构进行，婴幼儿配合度可能影响结果准确性。
粪便检测适用于婴幼儿群体。采集新鲜粪便标本检测还原糖含量，若≥++≥0.5g/dL提示乳糖吸收不良。同时检测粪便pH值，当pH值≤5.5时，表明肠道中存在未消化乳糖发酵产酸。该方法无创易行，但需排除其他原因导致的酸性便。
基因检测适用于先天性乳糖酶缺乏的辅助诊断。通过检测LCT基因多态性，可发现与乳糖酶持续性缺乏相关的基因变异。该检测特异性高但临床普及度有限，多用于家族性病例调查。
乳糖酶活性测定是直接诊断方法。通过小肠黏膜活检检测乳糖酶活性，单位面积酶活性低于正常值50%可确诊。由于属于有创检查，婴幼儿临床应用较少，多用于疑难病例鉴别诊断。
对于疑似病例，建议在儿科医生指导下进行诊断性治疗试验。采用无乳糖配方喂养2周后症状明显改善，重新引入乳糖饮食后症状再现，可支持诊断。需注意与牛奶蛋白过敏、感染性腹泻等疾病进行鉴别。
