青霉素G与四环素通常不建议合用，两者联用可能降低青霉素G的抗菌效果。青霉素G属于β-内酰胺类抗生素，通过抑制细菌细胞壁合成发挥作用；四环素则通过阻断细菌蛋白质合成起效，两者作用机制不同可能导致拮抗效应。
青霉素G对繁殖期细菌的杀灭作用较强，而四环素会抑制细菌生长繁殖，使细菌处于静止期，从而减弱青霉素G的杀菌效果。临床常见于治疗混合感染时，若需覆盖革兰阳性菌和阴性菌，更推荐选择其他协同组合如青霉素G联合氨基糖苷类抗生素。对于布鲁菌病等特殊感染，四环素类需与链霉素联用而非青霉素G。
在治疗梅毒螺旋体感染时，青霉素G是首选药物，四环素仅作为青霉素过敏者的替代方案，两者无协同作用。四环素还可能干扰青霉素G在组织中的分布浓度，影响其穿透血脑屏障等能力。对于肺炎链球菌性脑膜炎等严重感染，合用可能导致治疗失败或病程延长。
使用抗生素时应严格遵循医嘱，避免自行组合用药。青霉素G与四环素联用期间需密切监测疗效，若出现体温不退、症状加重等情况应及时调整方案。日常注意保持充足水分摄入，避免阳光直射四环素易致光敏反应，用药期间及停药后一周内不宜饮用乳制品影响四环素吸收。出现皮疹、呼吸困难等过敏反应需立即就医。
