亚叶酸钙片主要用于治疗叶酸缺乏引起的巨幼红细胞贫血、甲氨蝶呤过量的解毒以及氟尿嘧啶的增效治疗。
亚叶酸钙片可以作为叶酸的替代品，用于治疗由于叶酸缺乏导致的巨幼红细胞贫血。巨幼红细胞贫血主要是体内叶酸不足，影响了红细胞的正常成熟过程，可能出现乏力、面色苍白等症状。该药的活性成分亚叶酸能够直接参与核酸合成，无须经过体内还原步骤。用药期间需定期监测血常规，建议配合维生素B12治疗。
亚叶酸钙片可用于解救大剂量甲氨蝶呤治疗时引起的毒性反应。甲氨蝶呤是叶酸拮抗剂，过量使用会严重抑制细胞增殖，导致口腔溃疡、骨髓抑制等毒性反应。此时亚叶酸钙能竞争性对抗甲氨蝶呤的作用，减轻其对正常细胞的损害。临床常用于骨肉瘤、白血病患儿化疗后的抢救性治疗。
亚叶酸钙片与氟尿嘧啶联合使用时能增强后者抗肿瘤效果，主要用于结肠癌、胃癌等消化道肿瘤的化疗方案。亚叶酸钙可延长氟尿嘧啶对肿瘤细胞胸苷酸合成酶的抑制时间，提高化疗敏感性。常见不良反应包括腹泻、口腔炎等，需严格监控血象变化。
亚叶酸钙片可用于治疗新生儿缺氧缺血性脑病后的神经损伤。亚叶酸作为甲基供体参与髓鞘形成和神经递质合成，有助于改善脑代谢。通常需在出生后尽早开始静脉给药，后续可过渡到口服制剂，需配合神经营养支持治疗。
亚叶酸钙片还可用于预防甲氧苄啶导致的叶酸缺乏、辅助治疗银屑病以及某些先天性代谢缺陷病。对长期使用柳氮磺吡啶、苯妥英钠等药物的患者，亚叶酸钙可预防继发性叶酸缺乏。用药需根据具体病因调整剂量，避免与其他影响叶酸代谢的药物联用。
使用亚叶酸钙片期间应定期检查血液中叶酸和维生素B12水平，避免自行调整剂量。出现严重胃肠道反应或过敏症状需及时就医。饮食中可适量增加动物肝脏、深绿色蔬菜等富含叶酸的食物，但食物补充不能替代药物治疗。对药物成分过敏者、恶性贫血末明确诊断者禁用，孕妇及哺乳期妇女需在医生指导下慎用。
