亚叶酸钙片主要用于预防和治疗叶酸缺乏引起的巨幼红细胞性贫血，或与叶酸拮抗剂合用时减轻其毒性作用，对结肠癌、直肠癌等化疗药物也有增效作用。
亚叶酸钙片作为叶酸的活性形式，可直接参与DNA合成。当患者因叶酸摄入不足或吸收障碍导致巨幼红细胞性贫血时，亚叶酸钙能快速纠正造血功能异常。该疾病典型表现为乏力、舌炎、皮肤黏膜苍白等症状。临床常用亚叶酸钙片配合维生素B12治疗，需在医生指导下规范使用并定期监测血常规。
甲氨蝶呤等叶酸拮抗剂药物过量时，亚叶酸钙片能通过竞争性结合还原酶阻断药物毒性。其解毒机制为直接提供四氢叶酸前体，恢复被抑制的核酸代谢过程。使用需严格计算解救剂量与时间窗，常与甲氨蝶呤血药浓度监测联合应用。
亚叶酸钙片可通过稳定5-氟尿嘧啶与胸苷酸合成酶的结合三元复合物，显著提高其对结直肠癌的化疗效果。临床多采用亚叶酸钙注射液联合5-氟尿嘧啶的FOLFOX方案，需注意可能增加的黏膜炎、骨髓抑制等不良反应。
长期服用苯妥英钠、丙戊酸钠等抗癫痫药物可能导致叶酸缺乏。亚叶酸钙片能补充被药物消耗的叶酸储备，预防由此引发的贫血、周围神经病变等并发症。用药期间需监测血清叶酸水平及药物相互作用。
亚叶酸钙片还用于防治口腔溃疡、银屑病等与叶酸代谢相关的病症。对同型半胱氨酸血症患者，其可促进同型半胱氨酸再甲基化以降低心血管风险。具体应用需根据个体情况调整方案。
服用亚叶酸钙片期间应避免同时使用影响叶酸代谢的药物如磺胺类、苯巴比妥等。日常需保持均衡饮食，适量摄入动物肝脏、深绿色蔬菜等天然叶酸来源。胃肠功能异常者可选择饭后服药减少刺激，用药后若出现皮疹、呼吸困难等过敏反应需立即就医。建议定期复查血象、肝肾功能及血清叶酸浓度，长期用药者每半年检测维生素B12水平以防掩盖其缺乏症状。
