两性畸形性别发育异常的诊断需结合临床表现、染色体检查、激素水平和影像学结果综合判断。诊断标准主要依据性腺组织学特征、内外生殖器发育状态及激素分泌功能。
染色体核型分析是首要检查项目。46XX型可能与先天性肾上腺皮质增生症相关，46XY型则需排查雄激素不敏感综合征或5α-还原酶缺乏症。外周血淋巴细胞培养G显带技术可明确染色体性别。
激素检测包括基础测定和激发试验。促卵泡激素、黄酮体生成素、睾酮、双氢睾酮、抗苗勒管激素的异常水平可提示性腺功能障碍。17-羟孕酮显著升高需考虑21-羟化酶缺乏症。
影像学评估采用超声和磁共振。盆腔超声可显示子宫、阴道形态及性腺位置，磁共振能清晰分辨苗勒管和沃尔夫管衍生物结构。泌尿生殖窦造影有助于判断阴道与尿道融合情况。
生殖器外观评分按Prader分级标准。Ⅰ级为轻度阴蒂肥大伴大阴唇融合，Ⅴ级则完全呈男性外阴表现。同时需检查腹股沟区是否存在异位性腺组织。
基因检测已成为重要辅助手段。SRY基因、AR基因、CYP21A2基因等突变分析可明确特定类型。全外显子测序适用于复杂病例的病因筛查。
新生儿筛查发现外阴模糊者应立即启动诊断流程。儿童期发病者需评估生长曲线和青春期发育分期。诊断过程中应组建包括遗传科、内分泌科、泌尿外科的多学科团队。
确诊后需进行心理评估和社会性别认定。部分病例需通过腹腔镜确定性腺性质。所有诊断数据应严格保密，治疗决策需尊重患者及监护人意愿。
