异烟肼片主要用于治疗结核病，对结核分枝杆菌具有高度选择性杀菌作用。异烟肼片的作用主要有抑制细菌细胞壁合成、干扰细菌代谢、预防结核病传播、治疗活动性结核病、预防潜伏性结核感染等。
异烟肼片可通过阻碍分枝菌酸的生物合成，破坏结核分枝杆菌细胞壁的完整性。分枝菌酸是结核杆菌细胞壁特有的成分，药物特异性作用于该靶点后导致细菌细胞壁缺损，胞内渗透压失衡致使细菌溶解死亡。这一机制对生长繁殖期的结核杆菌具有强效杀灭作用，但对静止期细菌效果较弱。
药物能竞争性抑制结核杆菌的烟酰胺腺嘌呤二核苷酸代谢，干扰细菌的氧化还原反应系统。这种代谢干扰可造成细菌能量生成障碍，同时抑制细菌核酸合成，使得结核杆菌无法正常维持生命活动。该作用在酸性环境下尤为显著，有助于药物在巨噬细胞内的杀菌效应。
规范使用异烟肼片能有效降低结核病患者痰菌转阴时间，减少通过飞沫传播的风险。药物可快速消除病灶中的大量繁殖菌，使患者在治疗2周内传染性显著下降。对于密切接触者的预防性用药也能阻断潜伏感染进展为活动性结核病。
作为一线抗结核药物，异烟肼片对肺部及其他脏器结核病灶均有良好渗透性。药物在干酪样坏死组织中仍能保持杀菌浓度，可清除细胞内外的结核杆菌。需与其他抗结核药联用以避免耐药性产生，标准方案包括异烟肼片、利福平胶囊、吡嗪酰胺片、乙胺丁醇片的四联疗法。
对于结核菌素试验阳性但无活动性病灶者，单独使用异烟肼片可有效预防结核病发作。药物能杀灭体内休眠状态的结核杆菌，降低潜伏感染者发展为活动性结核病的概率。推荐疗程为6-9个月，需定期监测肝功能以防药物性肝损伤。
使用异烟肼片期间须严格遵医嘱完成全程治疗，不可擅自停药。治疗初期可能出现食欲减退、恶心等胃肠反应，通常1-2周后可自行缓解。用药期间应禁酒并避免高组胺食物，定期检查肝功能与神经系统症状。患者需保持均衡饮食，适当补充维生素B6以预防周围神经炎，保证充足休息并做好呼吸隔离措施。出现皮肤黄染、持续呕吐或手脚麻木时应立即就医。
